Veterinaria Trop. 28(1):49-62. 2003

*Investigador y
**Técnico Asociado a la Investigación. INIA.
Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias (CENIAP).
Instituto de Investigaciones Veterinarias. Sanidad Animal.
Apdo. 70. Av. Las Delicias. Maracay 2102.
estado Aragua. Venezuela.

**Profesor.
Instituto Universitario de Tecnología de los Llanos (IUTLL).
Valle de la Pascua, estado Guárico. Venezuela.

Recibido: junio 06. 2004

Un total de 50 muestras de hisopados nasales de becerros. con enfermedad respiratoria procedentes de dos fincas ubicadas en el estado Guárico. fueron analizados por estudios bacteriológicos. Los agentes bacterianos más frecuentes fueron Pasteurella multocida (28%), Streptococcus spp. hemolíticos (22%), Klebsiella pneumoniae (18%), Corynebacterium spp. (14%), Staphylococcus epidermidis (6%), Bacillus spp. (4%), Escherichia coli y Pseudomonas aeruginosa (2%). respectivamente. Se determinó predominio de bacterias aisladas en cultivos mixtos sobre las aisladas en cultivos puros. Se analizó la susceptibilidad antimicrobiana para los aislados de P. multocida frente a 13 agentes antimicrobianos de uso común en la práctica veterinaria, todos los aislados fueron sensibles para enrofloxacina y florfenicol. Altas frecuencias de resistencia fueron observadas para triple sulfa y trimetoprin-sulfametoxazol en ambas fincas.

Palabras Clave: Infección respiratoria; becerros, Pasteurella multocida; susceptibilidad antimicrobiana.

INTRODUCCIÓN

Las enfermedades respiratorias constituyen una de las infecciones más comunes en las explotaciones de ganado bovino y se consideran una de las principales causas de morbilidad y mortalidad alrededor del mundo (Ackermann y Brogden, 2000; Ames, 1997; Hollis, 1996).

Las estimaciones de pérdidas anuales en Estados Unidos son de un billón US$, debido a muertes, costos de tratamientos, y pérdida de la productividad, aún animales que se recuperan continúan respondiendo deficientemente (Pollreisz, 2001). En Venezuela estas afecciones se presentan con frecuencia y efectan en mayor proporción a los becerros, aunque no existen estadísticas oficiales que indiquen a cuanto asciende la mortalidad de becerros en el rebaño nacional, es conocido que el porcentaje de mortalidad es alto y varía ampliamente entre fincas. Datos recopilados en algunas explotaciones ganaderas del país indican que la mortalidad en becerros por afecciones respiratorias es de 58% (Obando, 2001).

Se ha determinado que los trastornos respiratorios en los bovinos se deben a causas multifactoriales, donde coexisten e interactúan dos grupos de factores, los predisponentes y los determinantes o desencadenantes.

Los predisponentes incluyen una variedad de agentes estresantes, relacionados al manejo y al medio ambiente. Los determinantes son agentes infecciosos virales y bacterianos quienes en última instancia desencadenan el cuadro clínico (Carter y Chengappa, 1993; Neira, 2001).

Entre los factores incriminados como predisponente y estresantes se incluye el destete, hacinamiento, transporte, ingreso de nuevos animales al rebaño, aglomeración, castración, descorne, mala alimentación, corrientes de aire, lluvia y cambios bruscos de temperaturas. Por otro lado, existen agentes infecciosos incluidos como desencadenantes porque determinan una disminución de los mecanismos de defensa normales del animal, entre estos .están los virus de Rinotraqueitis infecciosa bovina (IBR), Para influenza tipo 3 (PI3), diarrea viral bovina (DVB), virus respiratorio sincitial bovino (VRSB) y otros virus que puedan afectar el sistema respiratorio, así como también clamidias y micoplasmas (Carter y Chengappa 1993; Hollis, 1996; Neira 2001; Pollreisz, 2001)

Los agentes antes mencionados facilitan las condiciones para la adhesión e invasión de bacterias, las involucradas frecuentemente en casos fatales de enfermedad respiratoria de los becerros son del género Pasteurella particularmente Mannheimia (Pasteurella) haemolytica y Pasteurella multocida. Otras bacterias frecuentemente asociadas con esta afección son Haemophylus somnus y Arcanobacterium pyogenes (Aslan et al., 2002; Frank et al., 2003; Hollis, 1996; Panciera y Corstvet, 1984; Rusvai y Fodor, 1998; Tegtmeier et al., 1999) y otras bacterias consideradas como secundarias entre estas Streptococus spp., Klebsiella pneumoniae, Corynebacterium spp., y Staphylococcus spp. (Aslan et al., 2002; Selim et al., 1998).

Referencias de laboratorios de diagnóstico indican que las especies bacterianas aisladas de una típica neumonía con lesión pulmonar, cambian dependiendo de la progresión de la enfermedad. En los casos de neumonías agudas se indica que Mannheinia haemolytica es la bacteria más frecuentemente aislada y en estados más avanzados de la enfermedad cuando los animales son tratados inadecuadamente o no son tratados, el daño pulmonar es significativo y se aisla P. multocida, sola o en mezcla de cultivos. Cuando la enfermedad se hace más crónica y comienzan a aparecer abscesos se señala a Arcanobacterium pyogenes como agente causal (Hollis, 1996).

El método más efectivo y frecuentemente utilizado para contrarrestar la acción de estos agentes bacterianos, que conllevan en definitiva a la muerte del animal, es la terapia antimicrobiana. Sin embargo, se ha señalado resistencia a los antimicrobianos de uso común en gran cantidad de las bacterias relacionadas con esta infección especialmente en las del género Pasteurella. Por lo que se hace necesario, conocer el comportamiento de estos microorganismos frente a los antimicrobianos de uso frecuente con la finalidad de asegurar el éxito del tratamiento (Martel y Coudert, 1993; Post et al., 1991; Vogel et al., 2001; Watts et al., 1994).

El objetivo del estudio fue realizar la identificación de los agentes bacterianos de las infecciones respiratorias en los becerros de dos fincas del estado Guárico, así como evaluar in vitro el comportamiento del aislado más comprometido frente a antimicrobianos de uso común en la práctica veterinaria.

El ensayo se realizó en dos fincas (A y B), con diferentes sistemas de explotación ubicadas al norte y al sur del estado Guárico, la finca "A" está ubicada en las coordenadas U.T.M. huso "19", 771877 este y 1.071.508 norte y la finca "B" ubicada en el huso "20", 186 885 este y 1.008.975 norte. El estudio involucró la toma de muestras en 50 becerros, hembras y machos de alto mestizaje lechero con procesos neumónicos en edades comprendidas entre los 1 a 4 meses de edad.

En este sentido, los becerros de la finca A permanecían en becerreras separados en grupos etarios, alimentados con leche producto del ordeño mecánico, suplementados con alimento concentrado, heno y pasto picado. Los becerros de la finca B pastoreaban sobre potreros de soca de maíz o sorgo, antes del ordeño manual, posteriomente se colocaban en becerreras, y no se separaban en grupos etarios.

Los becerros y becerras de las fincas (A y B) no eran inmunizados contra IBR, PI3, DVB y VRSB. En la finca (A) las vacas preñadas eran inmunizadas uno a dos meses antes del parto, contra la Neumoenteritis infecciosa bovina. La finca (A) es catalogada como una finca de explotación intensiva y la finca B como semi-intensiva. Para realizar este trabajo, se recolectaron 50 muestras de hisopados nasales tomados de la parte más profunda de las cavidades nasales de becerros y becerras, con sintomatología de infección respiratoria, es decir todos los animales evaluados presentaban fiebre, estertores respiratorios, secreción muconasal o muco purulenta, anorexia y depresión.

Las muestras fueron recolectadas con culturetes BBL contentivo de un hisopo y una ampolla de'0,5 ml del medio transporte bacteriano de Stuart's modificado. Luego de recolectadas las muestras eran mantenidas refrigeradas hasta su llegada al laboratorio, para su evaluación bacteriológica.

En el laboratorio las muestras fueron sembradas directamente en los medios de agar tripticasa soya (Difco) adicionado de un 5% de sangre ovina, Agar Mac Conkey (Difco) y tioglicolato enriquecido (Difco), incubados a 37°C en condiciones aeróbicas y microaerofilícas por 24 a 48 h. El medio de tioglicolato fue subcultivado a las 24 h en placas de agar sangre y Mac Conkey, e incubadas en iguales condiciones. Las muestras que no presentaban desarrollo en estos medios a las 48 h, se consideraban negativas. La metodología para la identificación de los agentes bacterianos presentes, estuvo basada en la evaluación de las características morfológicas, culturales y bioquímicas (Koneman et al., 1999; MacFaddin, 1990).

Las pruebas de susceptibilidad antimicrobiana in vitro se realizaron para P. multocida utilizando la técnica de difusión con discos de acuerdo a las normas del NCCLS (1999). El inoculo consistió en un cultivo puro del aislado crecido en caldo Muller Hinton incubado 4-6 h a 37°C hasta obtener una concentración final igual a un patrón del nefelómetro de MacFarland N° 0,5, luego se sembraron en placas de agar Muller Hinton y se incubaron a 37°C por 18 h. La susceptibilidad se detenninó por la medida del diámetro de la zona de inhibición al comparar con tablas patrón. Las cepas utilizadas como controles de referencia fueron S. aureus ATCC 29213 y E. coli ATCC 25922

Los antimicrobianos utilizados y su concentración fueron: amikacina 30 mg, ampicilina 10 mg, cefalotina 30 mg, colimicina 10 mg, enrofloxacina 5 mg, estreptomicina 10 mg, florflenicol30 mg, kanamicina 30 μg, neomicina 30 JIg, tetraciclina 30 mg, trimetropin/sulfamethoxazole 23,75/1,25 mg, triple sulfa 300 mg y trimetropin 5 mg.

La evaluación bacteriológica de las muestras analizadas permitió detectar diferentes géneros bacterianos, entre los que se encuentran P. multocida (14), Streptococcus spp. (11), Klebsiella pneumoniae (9), Corynebacterium spp. (7), Staphylococcus epidermidis (3), Bacillus spp. (2), Escherichia coli (1), Pseudomonas aeruginosa (1) y en dos de las muestras no hubo desarrollo bacteriano.

Se observó una mayor frecuencia de aislamiento para P. multocida con un 28% seguida por Streptococcus spp., 22%, K. pneumonia 18%, Corynebacterium spp. 14%, y menores frecuencias exhibieron S. epidermidis 6%, Bacil/us spp. 4%, E. co/i y P. aeruginosa con un 2%, respectivamente (Cuadro 1).

En la finca A los aislados más frecuentes fueron Streptococcus spp.(12%), P. multocida y K. pneumoniae con frecuencias de 10%, respectivamente. En la finca B los más frecuentes fueron P. multocida (18%), Streptococcus spp. (10%) además de K. Pneumoniae y Corynbacterium spp., con (8%), respectivamente (Cuadro 1).

Mediante este estudio se realizó la identificación bacteriana de las infecciones respiratorias en becerros en dos fincas representando la P. multocida el agente bacteriano más frecuente aislado; lo que coincide con estudios que relacionan la presencia de P. multocida con los transtornos respiratorios de los becerros (DeRosa et al., 2000; Panciera y Corstvet, 1984; Rusvai y Fodor, 1998; Storz et al., 2000; Tegtmeier et al., 1999; Vogel et al.,2001).