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Veterinaria
Trop. 27(2): 75-85. 2002
Walkiria
Aragort*, Gustavo Morales, Edgar Le�n*, Luz
A. Pino *, Ana Guill�n* y Maglene Silva*
* Investigadores. INIA. Centro Nacional de
Investigaciones Agropecuarias. Recibido: octubre 28, 2003. |
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RESUMEN Con
el objetivo de determinar la posible asociaci�n entre las helmintosis
por monogeneos y cuadros patol�gicos y/o lesiones histopatol�gicas, se
realiz� un estudio parasitol�gico sobre el tejido branquial de 247
peces procedentes de la Estaci�n Experimental Papel�n; centro de
acuicultura ubicado en el estado Portuguesa, Venezuela. Para el estudio
se colectaron 30 peces por mes, desde marzo hasta diciembre, abarc�ndose
la �poca de sequ�a y de lluvia. Cuantificando el n�mero de monogeneos
presentes a nivel de cada arco branquial y su relaci�n con el tama�o,
el peso, los valores de hematocrito y el da�o epitelial del pez Colossoma
macropomum. Los resultados indicaron que el 17,07% de los peces
presentaron infestaci�n mixta (Anacanthorus spatulatus + Lynguadactyloides
brinkmanni). En este mismo porcentaje se observ� un descenso
significativo de los valores de hematocrito e hiperplasia severa de
lamelos y filamentos branquiales, lo cual est� asociado con la
presencia de L. brinkmanni. As� mismo, se encontr� asociaci�n
positiva del peso y la longitud de los peces con la carga parasitaria
branquial. Palabras Clave: Monogeneos; branquias; par�sitos; Anacanthorus
spatulatus; Linguadactyloides brinkmanni; Colossoma macropomum; cachama;
patolog�a. Son pocos los trabajos de investigaci�n realizados en
Venezuela sobre patolog�as asociadas a infestaciones parasitarias en
especies aut�ctonas bajo cultivo. En el pa�s fue en los a�os 70
cuando se iniciaron de manera sistem�tica, los estudios para el cultivo
de peces; mientras que la labor investigativa sobre parasitosis y otras
enfermedades se abordaron con �nfasis a partir de los a�os 90, la
mayor�a de ellos bajo la responsabilidad de instituciones p�blicas. Venezuela viene afrontando serios problemas en el
aspecto parasitario, en todas las especies acu�ticas sometidas a
cultivo (Mujica y Armas de Conroy, 1985; Aragort y Moreno 1997). Un
ejemplo de ello lo constituye la dactilogirosis, enfermedad branquial en
la cual el par�sito erosiona los filamentos branquiales y el pez
responde con un aumento de la producci�n de mucosidad e hiperplasia
epitelial; tambi�n se han detec�tado con frecuencia protozoarios
(mixosporidios
y tripanosomas) y trematodos digen�sicos (Aragort et al., 1997). En relaci�n a los
monogeneos, la mayor�a de �stos
se adhieren superfi�cialmente al epitelio de las branquias y
generalmente producen poco da�o al hospedador. Sin embargo, a�n las
especies no pat�genas como Anacanthorus spatulatus (Kritsky et
al., 1979), pueden inducir el descenso de la capacidad respiratoria.
El modo de fijaci�n de Linguadac�tyloides brinkmanni (Tatcher y
Kritsky, 1983) a las branquias del hospedador, difiere considerablemente
de otros monogeneos, en este caso existe activa penetraci�n del haptor
en el tejido branquial del pez, ya que al llegar la parte posterior del
par�sito al cart�lago del filamento, las anclas del haptor se fijan
directamente a esa estructura y el tejido cartilaginoso crece fijando el
par�sito a una localizaci�n permanente (Thatcher, 1991). MATERIALES Y M�TODOSPara el estudio fueron capturados 30 peces por mes, de
los que se proce�saron un m�nimo de 27, durante 9 meses, desde marzo
hasta diciembre en la Estaci�n Experimental Papel�n, del Instituto
Nacional de Investi�gaciones Agropecuarias, ubicada en el distrito
Guanare del estado Portu�guesa. Los peces fueron trasladados en bolsas
pl�sticas aireadas, hasta el laboratorio de Parasitolog�a de la secci�n
de Sanidad Animal, donde permanecieron en acuarios aireados, hasta su
procesamiento. Preparaci�n del material de estudio * Cada pez fue pesado en balanza de precisi�n y
medido con icti�metro. * Ex�menes hematol�gicos * Obtenci�n de las muestras Para la obtenci�n de sangre de alevines (ejemplares
peque�os), se corta el ped�nculo caudal en la regi�n posterior a las
aletas adiposa y anal. La sangre que brota se colecta en un tubo capilar
heparinizado para hematocrito. En cuanto a los ejemplares juveniles y adultos, la
sangre se toma direc�tamente de la vena caudal con ayuda de una jeringa
heparinizada (F.A.O. 1991). El estudio de hematocrito se realiza mediante la t�cnica
de tubos capilares � microhematocrito. Se observa el color del plasma,
registr�ndose cualquier variaci�n de su caracter�stica tonalidad
amarillenta p�lida. Procesamiento del tejido branquial Se seccionan los op�rculos, extray�ndose cada uno de
los ocho arcos branquiales, y posteriormente son colocados en c�psulas
de Petri, luego de lo cual se cuantificaron los par�sitos, mediante el
uso de una lupa estereosc�pica, detect�ndose Anacanthorus
spatulatus y Linguadac�tyloides brinkmanni, siguiendo las
descripciones realizadas por Thatcher (1991). En el material branquial fresco se registran los
valores correspondientes a:
Las muestras para estudios histopatol�gicos se toman
de peces reci�n sacrificados o moribundos. Las branquias se fijan en
formol al 10%. El material preservado es procesado siguiendo la
metodolog�a histol�gica cl�sica, para luego realizar la coloraci�n
correspondiente (ver Cuadro). An�lisis estad�sticoEl n�mero de peces a muestrear se bas� en la tabla propuesta por la F.A.O. en 1991; la cual establece el tama�o de muestra requerido para la detecci�n de por lo menos un portador en una poblaci�n pisc�cola, suponiendo una incidencia m�nima determinada de portadores en esa poblaci�n.
Los datos obtenidos en las diferentes observaciones
fueron analizados mediante pruebas estad�sticas no param�tricas,
debido a que las pobla�ciones de par�sitos se distribuyen siguiendo
una binomial negativa (Morales y Pino de Morales, 1987). Se aplic� la
prueba de la mediana de Mood y el coeficiente de correlaci�n de rangos
de Spearman. RESULTADOS Y DISCUSI�N Comparaci�n de carga parasitaria total con peso y
longitud de los peces Los niveles de infestaci�n fueron mayores en los
peces m�s grandes, se encontr� una relaci�n directa entre longitud y
peso del pez, eviden�ciando a su vez un coeficiente de correlaci�n de
r = 0,455
para peso y de r =
0,441
para longitud. Comparaci�n de valores de hematocrito en peces con
infestaci�n simple (A. spatulatus) y mixta (A. spatulatus +
L brinkmanni). El 17,07 % de los peces presentaron infestaci�n mixta
(4. spatulatus + L.
brinkmanni ).
Se realiz� an�lisis de las medianas a los valores de hematocrito,
aplicando la prueba de la mediana de Mood, tomando como punto de
comparaci�n el hecho de encontrar sobre el tejido branquial una o dos
especies de monogeneos, obteni�ndose en la comparaci�n de 188 peces, una diferencia muy significativa en los
valores de hematocrito (P<0,05). En tal sentido, los peces con
infestaci�n simple exhibieron un valor de la mediana de 26% y aquellos
con infestaci�n mixta uno de 22%. Siendo el factor par�sito el que
induce la disminuci�n del porcen�taje de hematocrito. El estudio histopatol�gico refleja que los par�sitos
detectados sobre los filamentos branquiales de Colossoma macropomum (Curier,
1881), inducen una respuesta de rechazo hacia la presencia del monogeneo
y que dicha reacci�n, difiere con la especie par�sita presente. La pre�sencia
de A. spatulatus produce una respuesta inflamatoria muy leve, en
muchos de los casos no se observan cambios notables en el tejido que
rodea al par�sito (Figura 1A). En el parasit�smo por L. brinkmanni,
existe una relaci�n m�s �ntima entre el par�sito y el tejido
(Figura 2A), lo cual estimula el desarrollo de un proceso inflamatorio
severo, rico en macrofagos y linfocitos. Igualmente, se observa metaplasia con p�rdida de lame
los y atrofia de c�lulas epiteliales, con frecuencia el tejido
encapsula al par�sito, 1. brinkmanni causa una" branquitis"
severa (Figura lB). Percibi�ndose la mayor�a de las veces en posici�n
interlaminar, causando retracci�n de lamelos y curvatura de los
filamentos (Figura 1 C ).
Se not� una gran diferencia en forma y tama�o entre A.
spatulatus y L. brinkmanni (Figura 2B), as� como el
aplanamiento del epitelio branquial causado por ambos par�sitos. Detect�ndose
una reacci�n fagocitaria alrededor de una larva, la cual se observ� en
proceso de reabsorci�n (Figura 2C ).
An�lisis f�sico-qu�mico del agua
Durante los meses de muestreo la temperatura del agua
present� un promedio de 27�C, el ox�geno disuelto fue en promedio de
3 mg 1-1 y el pH de 7,5.
Comparaci�n de carga parasitaria total con peso
y talla de los peces Los resultados de este trabajo difieren de los
encontrados por Mujica y Armas de Conroy (1985) quienes se�alan que los
peces que presentan las mayores cargas parasitarias son ejemplares
menores de 10 cm, igual�mente Paperna (1996) se�ala que las
infestaciones masivas s�lo se presentan en jureles, probablemente
debido a que ocurre alg�n tipo de reacci�n inmunitaria.
En la investigaci�n se encontr� una asociaci�n
positiva entre peso y talla con carga parasitaria, �sto puede dedeberse
al ciclo directo de repro�ducci�n de los monogeneos, que facilita la
auto-infestaci�n de Colossoma macropomum; adem�s, peces mas
grandes proporcionan mayor superficie de tejido branquial a ser
parasitado. Resultados similares fueron encon�trados en los par�sitos Diplectanum
aequans, D. laubieri (Silan y Maillard, 1990) y Dactylogirus sp.
(Flores-Crespo et al., 1992), en los que se encontr� adem�s de
una reinfecci�n cont�nua, una asociaci�n positiva entre edad y carga
parasitaria.
Comparaci�n de los valores de hematocrito en peces
con infestaci�n simple (A. spatulatus) y mixta (A. spatulatus
+ L brinkmanni).
Los valores de hematocrito y los cortes histol�gicos
permitieron deter�minar que la especie m�s pat�gena es L.
brinkmanni. Thatcher y Kristky (1983) consideran que al inicio de la
infestaci�n L. brinkmanni produce una lesi�n hemorr�gica
debido a la forma de adhesi�n profunda de los vermes, los cuales causan ruptura del epitelio cuando
cambian de posici�n. Esta especie induce un descenso en los valores de
hematocrito posiblemente por p�rdida de sangre, o debido a sus h�bitos
alimenticios ya que aparentemente se alimenta de gl�bulos rojos y de c�lulas
epiteliales (Thatcher, 1991).
La presencia de L. brinkmanni induce una "branquitis"
o hiperplasia de los filamentos branquiales de intensidad severa, con
atrofia de lamelos y filamentos ("laminitis"). Tambi�n el
estudio histopatol�gico sugiere que la presencia de los par�sitos
ocasiona proliferaci�n de c�lulas caliciformes (secretoras de moco), lo
cual produce en las branquias ese aspecto mucoso. Las investigaciones
realizadas por Thatcher (1991) indican que la respuesta inicial del
hospedador a la penetraci�n de L. brinkmanni es b�sicamente una
reacci�n inflamatoria, con numerosos linfocitos
y eritrocitos en los alrededores de la lesi�n. Este autor en 1983,
encontr� que esta especie es una de las m�s pat�genas, entre los mono�geneos
de peces, ya que su activa penetraci�n en el epitelio branquial est�
ayudado por las secreciones de las gl�ndulas cef�licas ubicadas en su
pro-haptor. As�, L. brinkmanni causa un cambio notable en la morfo�log�a
de los filamentos branquiales; hay hiperplasia epitelial prominente en la
zona del filamento donde esta adherido el par�sito; inclusive la "laminitis"
se observa en aquellos filamentos branquiales vecinos a este. Las dos especies de monogeneos presentes en Colossoma
macropomum exhiben caracter�sticas notables en cuanto al da�o que
causan al hospe�dador. Las observaciones microsc�picas directas
permitieron detectar la presencia de peque�os n�dulos color crema
alrededor de los ganchos del opistohaptor de L. brinkmanni, los
cuales no se detectaron en A. spatulatus. No obstante, con
frecuencia se observ� producci�n excesiva de mucus tanto en
infestaciones simples como mixtas; seg�n Mujica y Armas de Conroy (1985)
y Thatcher (1991); la mayor�a de los mono�geneos se adhieren
superficialmente al epitelio branquial y pueden moverse y producir peque�os
da�os, inclusive las especies menos pat�genas inducen una producci�n
elevada de mucus, como respuesta al est�mulo irritante de los ganchos,
las gl�ndulas cef�licas y de las anclas del opistohaptor. AGRADECIMIENTOS Al Instituto Nacional de Investigaciones Agropecuarias
(INIA). Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias (CENIAP),
personal de la Estaci�n Experimental Papel�n y a todo el personal del
Laboratorio de Parasitolog�a de Sanidad Animal, por haber hecho posible
la culminaci�n de esta investigaci�n.
SUMMARY A
parasitological study was performed on branquial tissues of 247 cachama
fish, Colossoma macropomum, from Papelon station, aqui�culture
center located in Portuguesa State, Venezuela. In order to deter�mine the
possible association between helminthiasis due to Monogenea and
pathological symptoms and/or histophatological injuries. Thirty fish per
month were collected during nine months (March- December) which extended
through the dry and rainy seasons. Number of monogeneas for each gill arch and
relationships with fish size, weight, packed cell volume (PCV) values, and
epithelial damages of gills were quantified. Results showed that 17,07% of
fish had mixed infection (Anacanthorus spatu�latus + Linguadactyloides
brinkmanni). A similar percentage of fish exhibited a significant
descent of PCV values, severe hyperplasia of gill lamellas and filaments
with the presence of L. brinkmanni. A positive association was also
found between weight and size of fish with gill parasite burden. Key
Words: Monogeneas; branquia; parasites; Anacanthorus
spatulatus; Linguadactyloides brinkmanni; Colossoma macropomum;cachama; pathologies. BIBLIOGRAF�A ARAGORT, W. y L. GONZ�LEZ de MORENO. 1997. �ndices
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