Vol. 9(2): 181-193 Zootecnia Trop., 1991

CONTRIBUCIÓN AL ESTUDIO DE LA FORMACIÓN DEL LUMEN Y APARICIÓN DE
 PRIMEROS ESPERMATOZOIDES EN LOS TÚBULOS SEMINÍFEROS Y EPIDÍDIMOS DE
 TORETES CRIOLLO RÍO LIMÓN Y BRAHMÁN

D. Ocanto¹, T. Linares², E. Sogbe²,A. Patiño²,  C. Ramos¹, y S. Escobar²

¹FONAIAP -Estación Experimental Guarico. Aptdo. 14. Calabozo, 
Estado Guarico. Venezuela
²Facultad de Ciencias Veterinarias. UCV. Aptdo. 4563. 
Maracay, Estado Aragua. Venezuela.
Recibido: 01-11-1990 

Este trabajo deriva de una Tesis de Grado (Magister Scientiarum) financiada por el FONAIAP.

INTRODUCCIÓN 

Desde el nacimiento hasta la pubertad, el parénquima testicular atraviesa por cinco fases: infantil, de proliferación, prepuberal, puberal y postpuberal o adulto (1 ). Durante la fase infantil, las células presentes dentro de los cordones son gonocitos y células de soporte, y los cordones seminíferos (futuros túbulos seminíferos) son compactos o sin lumen (1, 3, 5, 6). 

En la fase de proliferación hay un incremento del diámetro de los cordones, los gonocitos migran a la periferia de éstos, diferenciándose en espermatogonias y las células de soporte se diferencian en células de Sertoli, no apareciendo todavía el lumen (1, 2, 3, 6). Durante la fase prepuberal comienza y se completa la formación del lumen, haciendo su aparición los espermatocitos primarios, espermátidas y espermatozoides, con una amplia variación de acuerdo con las razas estudiadas (1, 3, 5,14, 15). En la fase puberal las células de soporte indiferenciadas se transforman totalmente en células de Sertoli, se incrementa el número de espermatocitos primarios y están presentes tanto espermátidas como espermatozoides o uno de ellos (1). La aparición de espermatozoides en los epidídimos es variable de acuerdo con la raza y según diferentes autores varían entre 10 y 18 meses (3, 5, 13, 15). 

La literatura disponible en cuanto a desarrollo histológico del testículo proviene en su gran mayoría de otros países. Este trabajo se propone contribuir con información proveniente de animales en medio tropical, 109 cuales a la luz de los resultados aparentan comportarse de una manera diferente a aquellos de países templados, en cuanto a su fisiología reproductiva. 

Los objetivos de este trabajo fueron: 

1. Determinar la aparición del lumen en los cordones seminíferos. 

2. Determinar la aparición de los primeros espermatozoides en la luz de los túbulos y en las diferentes partes delos epidídimos. 

3. Relacionar estos cambios histológicos con otros índices. 

4. Establecer comparaciones entre las razas Criollo Río Limón (CRL) y Brahmán (Br). 

MATERIALES Y MÉTODOS 

Los animales sujetos a esta investigación forman parte del rebaño del Programa Cooperativo en Ganadería de Carne que ejecutan conjuntamente el Fondo Nacional de Investigaciones Agropecuarias (FONAIAP) y la Facultad de Ciencias Veterinarias (UCV) ; el plan de manejo está basado en una temporada de servicio de 3,5 meses, la cual se inicia en la última semana del mes de mayo y culmina la primera semana del mes de septiembre. Se deriva, en consecuencia, una limitada temporada de nacimientos entre los meses de marzo y junio inclusive y una temporada de destete desde octubre hasta enero inclusive. Desde el nacimiento, los becerros estuvieron con sus madres en potreros de pastos naturales hasta el momento del destete, el cual se realizó entre 6,5 y 7 ,5 meses de edad; es decir, a un promedio de siete meses. En este momento, consumieron 1 Kg. de alimento concentrado y pasto de corte por un período de cinco días, al final de cuyo lapso fueron enviados a potreros de pasto alemán (Echynochloa polystachia), en los cuales permanecieron hasta finalizar el período de investigación. Estos animales estuvieron bajo estricto plan sanitario; información adicional en cuanto a manejo, sanidad, reproducción, etc. de este programa, ha sido descrita por otros autores (7, 8, 10, 11 ). 

Se utilizaron 21 animales, pertenecientes a las razas CRL y Br, organizándose de acuerdo con la raza y en cinco grupos de edades, tal como se detalla en el Cuadro 1. En su oportunidad se castraron los animales de cada una de las razas en estudio. En ese momento, los epidídimos fueron separados de los testículos. Estos fueron seccionados por un corte a través del mediastino testicular y se tomaron porciones de tejido de aproximadamente 1 cm3 cada una, de la periferia y centro de ellos. A partir del grupo incluido en las edades nueve y diez meses, se tomaron cinco porciones de tejido de los epidídimos respectivos, de acuerdo con el método utilizado por Abdel-Raouf (1 ). Una vez extraídas las respectivas porciones de tejido, éstas se fijaron en solución Bouin por 24 horas y luego fueron conservadas en alcohol de 70° hasta el momento de su procesamiento para estudio. histológico, el cual se realizó siguiendo la metodología convencional para observación de los cortes con microscopio de luz. De cada muestra se efectuaron cortes para coloración con hematoxilina-eosina. 

Para describir los resultados observados en los testículos y los epidídimos, se decidió hacerlo de acuerdo con las siguientes pautas: 

- Si los cordones sexuales estaban compactos se describió este estado con una cruz (+). 

- Cuando se identificó la presencia de lumen en los túbulos seminíferos, el grado se describió con una, dos o tres cruces, de acuerdo a la existencia de escasa, regular o suficiente luz, respectivamente. 

- Cuando se observó la presencia de espermatozoides en la luz de los túbulos seminíferos, se identificó con una, dos o tres cruces, de acuerdo con la cantidad, si fue escasa, regular o suficiente, respectivamente. 

Cuando aparecieron los espermatozoides en la luz del epidídimo, se estableció la misma clasificación del punto anterior. 

El análisis de la información obtenida fue totalmente descriptivo. 

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Período de 6 a 8 meses 

Abdel-Raouf (1) estableció que durante la fase prepuberal comienza y se completa la formación del lumen en los túbulos seminíferos. Si se toma esta evidencia como válida, en el presente trabajo dicha fase prepuberal comenzaría a partir de los seis meses; es decir, cercana al período indicado por Abdel-Raouf (1 ), quien la observó a partir de la semana 20 de nacimiento (4,5 meses). Sin embargo, Ocanto et al (9) proponen que el período prepuberal en estas razas estudiadas comienza a evidenciarse con el inicio del desprendimiento del prepucio, el cual coincide con un desarrollo también marcado de la circunferencia escrotal. En los Cuadros 2 y 3 se observa que en los tres CRL, aun cuando existe todavía un grado de compactación de los cordones sexuales, también se señala que ya ha comenzado la luminización; mientras que en los 3 Br, sólo en uno comenzó la luminización. Se indicó que este material no fue analizado estadísticamente, por lo tanto, sería arriesgado por el bajo número de animales, pensar o señalar que existen diferencias raciales. No obstante, hay una tendencia a que en los CRL se presente un grado ligeramente mayor de madurez. Lo que sí se puede indicar es que, posiblemente, antes de seis meses hay un estado de compactación de los cordones sexuales en ambas razas, comparable con la fase de proliferación descrita por Abdel-Raouf (1, 2) a partir de la semana ocho. Santamaría y Reece (14) establecieron en su trabajo, que el lumen comenzó a formarse a los 4,5 meses; Igboeli y Rakha (5) lo observaron por primera vez a los 7 meses; Aire y Akpokodje (3) señalan 40 semanas (9,3 meses) como el momento de iniciarse su formación; Raja y Rao (12) indicaron que se inició a los 5 meses y Wildeus y Entwistle (15) determinaron que este proceso se inició a partir de los 6 meses. 

Cuadro 2. Desarrollo de lumen y aparición de espermatozoide en los túbulos seminiferos y epididimos en Criollo río Limón (CRL).

Cuadro 3. Desarrollo de lumen y aparición de espermatozoide en los túbulos seminiferos y epididimos en Brahmán (Br).

Período de 9 y 10 meses 

El único CRL correspondiente a este período tuvo un buen desarrollo de sus túbulos seminíferos, clasificándosele con grado suficiente de luminización. Mientras que en los Br éste osciló entre escaso y moderado. Parece existir aquí la misma tendencia señalada en el período anterior, en el que los CRL tuvieron, aparentemente, un desarrollo más avanzado del epitelio germinal del testículo en relación con los Br, con una característica adicional que, en ambas razas, ya no se observaron túbulos compactos a partir de este período. 

Período de 13 a 15 meses 

Llama la atención de este período la similitud, expresada en la estructura histológica, en los testículos de los CRL en relación con los de su misma raza del período precedente; en los tres animales la luminización fue igual y de grado suficiente; mientras que los testículos de los dos Br avanzaron en su grado, respecto al grupo de nueve a diez meses, hacia un grado de luminización oscilante entre moderado y suficiente, manteniéndose así la tendencia de diferencia racial en cuanto al grado y avance en la formación del lumen. Con los datos disponibles en este trabajo, pudiera señalarse que en los CRL el inicio y finalización del proceso de estructuración del lumen estuvo comprendido entre los seis y diez meses de edad, en tanto que en los Br esa misma etapa transcurrió entre los 6 y 15 meses de edad. 

Si bien el momento del inicio de la formación del lumen en los túbulos fue semejante a lo descrito en la literatura, no es así respecto a la duración de todo el proceso. En Bos taurus: Santamaría y Reece (14) determinaron que el proceso de formación del lumen estuvo comprendido entre 4,5 y 5,5 meses; Abdel-Raouf (1) lo determinó entre 4,6 y 7,5 meses; Raja y Rao (12) observaron que ese proceso se desarrolló entre los cinco y seis meses de edad. En Bos indicus: Aire y Akpokodje (3) identificaron ese período entre los 9,3 y 10,3 meses de edad. Como se observa, la mayoría de los autores que describen el proceso completo, obtuvieron un intervalo variable entre uno y tres meses, mientras que en este trabajo, en CRL aproximadamente fue de cuatro meses y en Br de nueve meses. 

Dos interrogantes se derivan de esta discusión: ¿por qué el período de formación del lumen es duplicado en los CRL y triplicado en los Br en relación con el período observado en la literatura?, ¿cuáles factores pudieran afectar la duración de este período? 

Las respuestas a estas incógnitas, deberán darse como consecuencia de futuros trabajos de investigación. Sin embargo, los comentarios a continuación, pretenden establecer un marco de referencia y guiar hacia hipótesis concretas. 

Los machos evaluados fueron destetados durante los meses de octubre, noviembre, diciembre y enero, a una edad promedio de siete meses; es decir, en el período correspondiente a aquél en el cual comenzó la formación del lumen en los túbulos seminíferos y que marca, a su vez, el comienzo de la espermatogénesis (1, 4). Es éste, entonces, un período crítico que exige condiciones adecuadas, no solamente desde el punto de vista nutritivo, sino también en las condiciones ambientales generales. 

El destete per se se constituye en u n factor de estrés para el animal, no sólo por la separación de su madre sino también por el hecho que, en adelante tendrá que conseguir solo su alimento. Si a esto se adiciona el tener que desenvolverse en un ambiente desfavorable como es la situación de verano, caracterizada en el Estado Guarico por una alta radiación solar, altas temperaturas y, en algunos casos, limitada oferta de pastos; se entiende, en consecuencia, que la espermatogénesis a pesar de iniciarse no se completa y la espermiogénesis no se cumple hasta aquel momento en que posiblemente se armonice la fisiología del animal con el medio ambiente. 

Lamentablemente, por problemas ajenos a este trabajo, no se pudo obtener la información de las edades comprendidas entre 16 y 19 meses, que hubieran explicado si definitivamente la espermiogénesis se inicia en esta fase o en la siguiente a partir de 20 meses, como fue obtenida. Quizás no es aventurado señalar que, en este período, pudo haberse encontrado espermatozoides suficientes, tanto en los túbulos seminíferos como en el epidídimo en los CRL y esto es posible señalarlo porque en los tres primeros períodos de edades establecidos en este trabajo, se observó en esta raza tendencia a un estado más avanzado de desarrollo en la luminización de los túbulos, en relación con los Br. Esto concuerda con Ocanto et al (9), quienes señalaron que a pesar de no existir diferencias estadísticas en cuanto a edad a pubertad, los CRL tendieron a alcanzar ésta más temprano que los Br, no obstante ser los Br más pesados y con mayor circunferencia escrotal que los CRL. 

Período de 20 a 21 meses y 22 a 23 meses 

Estos dos períodos son muy semejantes dentro y entre las razas. La característica más importante es la aparición de los primeros espermatozoides en la luz de los túbulos seminíferos y de los epidídimos. Como consecuencia de esto, histológicamente se pueden señalar los 20 meses como la edad a la cual se inició la pubertad en ambas razas. Ocanto et al (9) hicieron extracciones periódicas de semen, y determinaron la edad a pubertad a 566,1+99 días (18,9 meses) en CRL y 648,8+108 días (21 ,6 meses) en Br; estas edades están muy cercanas a aquella obtenida examinando el estroma testicular (20 meses). 

Abdel-Raouf (1) observó los primeros espermatozoides en los túbulos al final de la fase prepuberal, alrededor de la semana 32 (7 ,5 meses) ya esta misma edad fueron advertidos en los epidídimos, en cuyos últimos dos estratos observó la mayor densidad espermática. En el presente trabajo se observó esta característica a partir del segundo y tercer estratos. Igboeli y Rakha (5) determinaron que a los 11 meses aparecen los primeros espermatozoides en el epidídimo. Aire y Akpokodje (3) señalaron que los espermatozoides fueron encontrados por primera vez en los túbulos a las 48 semanas (11 ,2 mesas) y estuvieron presentes en todos los estratos del epidídimo a la semana 60 (14 meses). Raja y Rao (13) los observaron por primera vez a los diez meses en todo el epidídimo, con una mayor concentración en la cola, en comparación con la cabeza y cuerpo. 

Ocanto et al (9) determinaron el inicio del desprendimiento prepucial alrededor del año de edad, en ambas razas. Es decir, aproximadamente seis meses más tarde del comienzo en la formación del lumen, en orden inverso a aquél descrito por Abdel-Raouf (1 ), quien describe que el inicio del desprendimiento prepucial ocurrió al mes de nacimiento y la luminización de los túbulos a los dos meses. 

El final del desprendimiento fue determinado por Ocanto et al (9) a las edades de 19,5 y 21 ,4 meses en CRL y Br, respectivamente, y el grado suficiente de luminización fue observado también en este orden; es decir, primero culminó el proceso en los CRL y luego en los Br, pero a pesar de ocurrir en el mismo orden, fue amplio el margen de tiempo entre la luminización completa y el final del desprendimiento, en ambas razas. Abdel-Aaouf (1) señala haber determinado estos dos momentos aproximadamente en el mismo período (7 ,5 meses). Es obvio que se requiere una mayor y minuciosa investigación para evaluar el desarrollo de estos procesos en condiciones tropicales, ya que aparentan obedecer a varios factores no determinados en este trabajo. 

El mayor incremento de la circunferencia escrotal y el finar del desprendimiento prepucial en ambas razas fue descrito por Ocanto et al (9) entre los 18 y 24 meses, período que coincidió con la aparición de espermatozoides en la luz de los túbulos. 

La convergencia alrededor de una misma etapa de estos tres acontecimientos validan la investigación y le dan coherencia a los resultados obtenidos en este trabajo. 

CONCLUSIONES 

Teniendo presente el número de animales utilizados en este trabajo, en algunos grupos fue escaso, es posible a pesar de ello llegar a conclusiones parciales: 

1. El proceso deformación del lumen tuvo una tendencia a culminar más temprano en los CRL respecto a los Br, a pesar de ser esta última, una raza de mayor peso a la pubertad que el CRL como lo señalan otros trabajos con el mismo material genético. 

2. El periodo tan prolongado de formación del lumen en ambas razas podría ser explicado porque durante ese período convergen el destete y condiciones climatológicas adversas, procesos ambos que se constituyen en estrés para los animales y que bien pudieran alterar su dinámica fisiológica.

RESUMEN 

Se evaluaron 21 animales de las razas Criollo Río Limón (n = 11) y Brahmán (n = 10) con el objetivo de estudiar histológicamente, en los testículos, el proceso de formación del lumen de los túbulos seminíferos y determinar el período durante el cual aparecen los primeros espermatozoides, tanto en los túbulos seminíferos como en los epidídimos. Los machos bajo estudio estuvieron bajo condiciones de pastos naturales hasta el destete, a partir del cual fueron a pastos cultivados. El estudio fue llevado a cabo en la Estación Experimental FONAIAP -Guarico, Calabozo, Estado Guarico. Mediante el correspondiente estudio histológico se determinó que el proceso de luminización, en ambas razas, se inició a los seis meses, pero varió en duración. En CRL estuvo comprendido entre 6 y 10 meses y, en Br osciló entre 6 y 15 meses. Los primeros espermatozoides aparecieron a los 20 meses de edad, en ambas razas, tanto en la luz de los túbulos como en la de los epidídimos. Los resultados señalan una tendencia en los CAL a culminar su proceso de luminización más temprano que en los Brahmán. 

SUMMARY 

Twenty one animals were evaluated ofthe breeds Criollo Rio Limon (CRL n=11) and Brahman (Br n=10), with the objective of studying, histologically in the testicles, the process of lumen formation in the seminiferous tubules and to determine the period during which the frist sperms appeared in the seminiferous tubules and in the epididymis. Males under study were in natural pasture conditions up to weanning from there on they were in cultivated pasture. The study was conducted at the Guarico Research Station (FONAIAP) Calabozo, Guarico State, Venezuela. During the histological study was determined that the process of lumen formation in both breed groups was iniciated at six month but varied in duration: in CRL males was carried out between six and ten months and in Br males was between six and fifteen months. The first sperms appeared at twenty months of age in both breeds as well in the lumen of the tubules as in the epididymis. The results show a tendency in the CRL to finish the process of lumen formation eartier than Brahman. 

BIBLIOGRAFÍA 

1. ABDEL-RAOUF, M. The postnatal development of the reproductive organs in bulls with special reference to puberty. Acta Endocrinológica. Suppl. 49. 109 p. 1960. 

2. ABDEL-RAOUF, M. The proliferation of germ cells in the testes of bull claves and young bulls. Acta Vet. Scand. 2: 2231, 1961. 

3. AIRE, I. A. and J. U. AKPOKODJE. Delopment of puberty in the white Fulani (Bos indicus) bulls calf. Sr. Vet. J. 131 : 146-151.1975.

4. AMANN, R. P. and B.O. SCHANBACHER. Physiiology of male reproduction. J. Anim. Sci. 57 (Suppl. 2): 380-403. 1983. 

5. IGBOELI, G. and A. M. RAKHA. Puberty and related phenomena in Angoni (Shorthorn Zebu) bulls. J. Anim. Sci. 33 (3): 647-650.1971. 

6. LEVASSEUR, M. C. and C. THIBAUL T. Reproductive lit cycles. En: ESE Hatez (ed.). Reproduction in tarm animals. 627 p. 4th. Ed. Lea & Febiger. Philadelphia. USA. 1980. 

7. LlNARES, T.; M. BURGUERA; D. PLASSE; J. ORDÓÑEZ; O. VERDE; M. GONZÁLEZ y L. FROMETA. Comportamiento productivo de Bos taurus y Bos indicus y sus cruces. V. Pubertad en Novillas. ALPA, Men. 9: 91. (Abstr.) 1974a. 

8. LlNARES, T.; D. PLASSE; M. BURGUERA; J. ORDÓÑEZ; J. RÍOS; O. VERDE y M. GONZÁLEZ. Comportamiento productivo en Bos taurus y Bos indicus y sus cruces en el llano venezolano. I. Eficiencia Reproductiva. ALPA Mem. 9: 289-301. 1974b. 

9. OCANTO, D.; T. LlNARES; A. PATIÑO; C. RAMOS y S. ESCOBAR. Índices de pubertad en bovinos machos Criollo Río Limón y Brahmán. Zootecnia Tropical 

10. PEÑA DE B. N.; B. MÜLLER-HAYE; O. VERDE; D. PLASSE; J. RlOS y M. GONZÁLEZ. Comportamiento productivo de Bos taurus y Bos indicus y sus cruces en el llano venezolano. II. Peso al Nacer. ALPA Mem. 9: 303-311. 1974. 

11. PLASSE, D. Sistemas gen éticos para el mejoramiento de la producción pecuaria en el trópico. En: Centro Internacional de Agricultura Tropical (Ed.) El potencial para la producción de ganado de carne en América Tropical. 307 p. Serie CS-1 0. Cali-Colombia. 1975. 

12. RAJA, C. K. S. V. and R. A. RAO. Note on histological development of testis of Brown Swiss cross-bred bulls.lndian J. Anim. Sci. 52 (12): 1243. 1982.

13. RAJA, C. K. S. V. and R. A. RAO. Histological development of epididymis of Brown Swiss cross-bred bulls. Indian J. Anim. Sci. 53 (1): 70-73.1983. 

14. SANTAMARÍA, E. and R. P. REECE. Normal development of the germinal and seminiferous tubules in the bull. Am. J. Vet. Res. 18: 261-278. 1957. 

15. WILDEUS, S. and K. W. Entwistle. A quantitative histological study of testicular and epididymal development in Bos indicus cross bulls. Anim. Reprod. Sci., 6: 1-10. 1983.